Розшифровка аналізу на токсоплазмоз здійснюється виключно кваліфікованим спеціалістом у лабораторних умовах. При плануванні вагітності і на ранніх етапах виношування плоду аналіз на токсоплазмоз входить в перелік обов’язкових досліджень. Важливість проблеми діагностики токсоплазмозу пов’язана з високою ймовірністю внутрішньоутробного зараження дитини, що призводить до виникнення множинних вад розвитку, несумісних із життям, і звичним невынашиваниям вагітності.
Крім того, дослідження на токсоплазмоз, як одне з найважливіших опортуністичних захворювань при ВІЛ-інфекції, займає важливе місце в клініці інфекційних захворювань.
Різновиди аналізів
Для діагностики токсоплазмозу розроблено велику кількість лабораторних досліджень, які застосовуються для підтвердження інших захворювань. Кожне з досліджень має різну чутливість та специфічність, визначає окремі фази захворювання і необхідно для комплексного обстеження.
В медичній науці під чутливістю мається на увазі частка істинно позитивних результатів, тобто частота отримання позитивних результатів у дійсно хворих людей. Під специфічністю розуміють частку істинно негативних результатів: частоту отримання негативних результатів у людини, що не має захворювання. Обидва показники вимірюються у відсотках. Чим вище показник, тим краще метод дослідження. Фаза захворювання може бути визначена тільки при обліку різних доступних методів дослідження. Аналіз на токсоплазмоз проводиться за допомогою наступних методів:
На сьогоднішній день частіше всього користуються першими двома: імуноферментним аналізом (ІФА) та полімеразної ланцюгової реакції (ПЦР). Інші дослідження застосовуються значно рідше з різних причин, але їх не можна вважати такими, що втратили свою значимість.
Реакція імунофлуоресценції володіє чутливістю близько 90-98% і специфічністю, близькою до 100%. Сенс методу полягає у взаємодії «мічених» специфічних антитіл з досліджуваним антигеном у різних біологічних матеріалах, отриманих від хворого.
Для проведення даного дослідження можна здати аналіз крові, сечі, спинномозкової рідини, кісткового мозку і матеріалів, отриманих при пункції.
Якщо в біологічному матеріалі є токсоплазма, то з нею взаємодіють антитіла. Утворюється специфічний комплекс антиген-антитіло. Після «змивання» робочого розчину проводять мікроскопію матеріалу при спеціальному освітленні. Мічені антитіла при цьому світяться. На цьому феномені ґрунтується підтвердження діагнозу.
Загальний аналіз крові не належить до специфічних методів обстеження на токсоплазмоз. Проте кров людини реагує поруч змін на розвиток більшості інфекцій. Ці зміни проявляються у збільшенні вмісту лейкоцитів (норма — до 10 г/л) переважно за рахунок лімфоцитів, збільшення швидкості осідання еритроцитів (вище 15 мм/год).
Імуноферментний аналіз
Імуноферментний аналіз за принципом схожий на реакцію імунофлуоресценції. Відмінність полягає в тому, що комплекс антиген-антитіло визначається за допомогою специфічних ферментів, які взаємодіють виключно з одним видом комплексу. Чутливість і специфічність цього методу близько 99%. Високі рівні даних показників, а також простота виконання і висока швидкість отримання результатів роблять цей метод найбільш ефективним в діагностиці токсоплазмозу.
У відповідь на проникнення в організм людини збудника відбувається утворення специфічних антитіл. Це нормальний відповідь імунної системи, один з варіантів боротьби з інфекційними захворюваннями. Антитіла потрапляють в кровотік, виявляють антигени (молекули токсоплазми) і зв’язуються з ними.
На початковому етапі хвороби відбувається синтез «ранніх» імуноглобулінів (друга назва антитіл). Їх позначають як імуноглобуліни М (Ig M). Пік синтезу ранніх антитіл припадає на 2-3 тиждень від зараження. Дещо пізніше запускається процес освіти «пізніх» антитіл, що називаються імуноглобулінами G (Ig G).
Пік освіти пізніх антитіл виявляється через 2-3 місяці. Вони можуть зберігатися протягом багатьох років, іноді на все життя.
Для того щоб правильно розшифровувати результати імуноферментного аналізу, необхідно засвоїти такі поняття, як афінність та авідність. Під аффинностью розуміється стійкість комплексу антиген-антитіло. Це більш загальний показник, який вказує, що антитіла з антигенами можуть бути міцно або, навпаки, неміцно. Міцність ж зв’язку позначається терміном «авідність». Іншими словами, авідність — це ступінь афінності. Цей показник вимірюється у відсотковому відношенні між прочносвязанными антитілами до антитілам, пов’язаними слабо. Чим вище авідність, тим більш специфічні антитіла.
Розшифровка аналізу полягає в порівнянні рівнів різних типів антитіл та їх авідності. Проте варто відзначити, що постановка точного і остаточного діагнозу виключно на результатах ІФА неможлива.Для цього необхідна оцінка клінічних проявів, результатів загальноклінічних і спеціальних інструментальних методів дослідження, аналізу крові за допомогою полімеразної ланцюгової реакції.
Інтерпретація результатів імуноферментного аналізу
Особливе значення в діагностиці наявності інфікування токсоплазмою і в разі його підтвердження і визначення фази захворювання має імуноферментний аналіз з визначенням ранніх і пізніх антитіл до збудника та їх авідності. Найбільш важливий цей аналіз при плануванні вагітності і в перших її триместрах.
Якщо результати імуноферментного аналізу зазначено, що ранні і пізні антитіла (Ig M і Ig G) не виявлені, то це означає, що в організмі немає токсоплазми і ніколи раніше не було. Це гарна новина, так як організм вільний від збудника, токсоплазмозу в даний момент немає.
Однак люди можуть легко заразитися цим збудником від домашніх тварин (кішок, собак), при вживанні зараженого недостатньо термічно обробленого яловичого м’яса.
Якщо зараження відбувається під час вагітності, то розвивається гостре захворювання. Для матері це навряд чи загрожує чимось серйозним, проте плід піддається серйозній небезпеці. У 80% випадків первинного зараження виникає ураження дитини з залученням в патологічний процес нервової системи, очей і серцевого м’яза. Це загрожує важкими вадами розвитку та смертю незабаром після народження.
Аналіз крові на токсоплазмоз може показати, що є Ig G, але немає Ig M. Такий варіант можливий у разі давнього контакту із збудником або про перенесене раніше захворювання. Пізні антитіла захищають організм матері і дитини від патогенного впливу токсоплазми. Однак необхідно додаткове обстеження за допомогою ПЛР та визначення авідності антитіл, щоб підтвердити стійкість антитіл.
Результати аналізів можуть показати позитивні Ig M і негативні Ig G. Це свідчить про гостру первинної інфікованості організму. Дана ситуація є найбільш несприятливою. Особливо при підтвердженні гострого захворювання в ПЛР. Ризик ураження плоду найбільш високий.
У тому випадку, якщо аналіз на токсоплазмоз містить вказівку на наявність позитивних ранніх і пізніх антитіл, необхідно подальше повноцінне обстеження з використанням усіх доступних методів, так як таке співвідношення антитіл у більшості випадків говорить про гострому процесі. Хоча у деяких людей Ig M можуть зберігатися до 2 років.
Що означають показники авідності?
Авідність вказує на те, що зданий зразок крові містить антитіла певною мірою схожості з токсоплазмою. Чим вище цей показник, тим більш специфічні антитіла виробляються імунною системою. Можна порівняти антитіла з ключем, а антигени збудника — з замком. Так от, чим більше авідність, тим краще ключ підходить до замка. А це говорить про те, що імунна система мала досить часу, щоб створити максимально специфічні молекули імуноглобулінів. Виділяють 3 варіанти авідності:
При ступеня авідності менше 40% антитіла вважаються низкоавидними. Іншими словами, вони ще молоді, незрілі. Тобто після першого контакту з токсоплазмою пройшло ще занадто мало часу. Низькоавидні антитіла характерні для гострої ранньої інфекції.
Кров може містити перехідні антитіла (авідність 41-59%). Інфекціоністи стверджують, що авідність антитіл знаходиться в «сірій зоні», тобто не можна сказати з достатньою достовірністю про стадії процесу. Необхідно повторити дослідження через 2-3 тижні.
Аналіз на токсоплазмоз з высокоавидными (понад 60%) антитілами свідчить, що імунна система отримала достатньо даних про ворога (токсоплазми) і підготувала проти нього найбільш ефективні антитіла. У такому разі підтверджують факт про перенесеної інфекції або про хронічному носійстві. Цей варіант найбільш сприятливий в плані прогнозу вагітності.
Полімеразна ланцюгова реакція
Токсоплазма — найпростіший одноклітинний мікроорганізм. Так само, як і все живе, він містить генетичний матеріал, який закодований у послідовності дезоксирибонуклеїнової кислоти (ДНК). За допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) можна встановити наявність в будь-якої біологічної рідини (крові, сечі, калі, спинномозкової рідини) токсоплазми. Чутливість і специфічність ПЛР для токсоплазми наближається до 100%. Крім того, з допомогою цього аналізу можна визначити збудника, навіть якщо в досліджуваному матеріалі знаходяться поодинокі молекули ДНК.
ПЛР в діагностиці токсоплазмозу є обов’язковим підтверджує аналізом. Тільки позитивний результат цього методу дає однозначну відповідь на запитання про наявність збудника в організмі і активності захворювання.
Як підготуватися до здачі аналізу?
Завжди, коли лікар призначає проведення аналізів, він зобов’язаний пояснити, як здавати матеріали для дослідження. Враховуючи високу точність і специфічність імуноферментного аналізу та полімеразної ланцюгової реакції, якихось особливих приготувань перед виконанням аналізу немає. Проте є деякі загальні вимоги до проведення будь-якого аналізу крові:
x
Слід враховувати, що аналізи не є діагнозом. Будь-який метод діагностики недосконалий. Навіть незважаючи на високі показники чутливості та специфічності, залишається ймовірність хибнопозитивних або хибнонегативних результатів. Тому вирішальне значення в постановці діагнозу залишається за лікарем, який оцінює пред’являються скарги, історію розвитку захворювання, дані об’єктивного обстеження та результати додаткових діагностичних процедур.